Milo (Single – Cell Western)

16/03/2020 Milo (Single – Cell Western), Sản phẩm, Sinh học phân tử - Protein simple Chili System

Milo – Single-Cell Western

Ứng dụng trong lĩnh vực nghiên cứu tế bào gốc, miễn dịch, tế bào ung thư, giúp hiểu biết về một nhóm nhỏ tế bào trong một mẫu, hiểu được hiệu quả của thuốc tác động lên việc biến đổi biểu hiện của tế bào, hiểu được biến đổi của tế bào trong một nhóm tế bào khi bị kích thích.

– Các công cụ hiện tại như: Western Blot, RNA-Seq, Flow Cytometry không đủ để phân tích protein đơn bào. Vì vậy, Milo machine dựa trên sức mạnh của western blotting để phân tích tế bào đơn từ nhóm tế bào. Nó dựa trên phương pháp đo protein cộng với thông tin không đồng nhất về mẫu của bạn.

– Có thể đo lường 1.000 tế bào đơn /1 lần chạy

– Nó có thể phối hợp để đo nhiều protein (thường khoảng 4)/ single-cell

– Milo giúp tiết kiệm thời gian so với western blotting thông thường – tổng công việc là 4-6 giờ hoặc 3-4 giờ mà không cần phải thực hiện bằng tay ở các khâu phân tích

– Và cuối cùng, Milo sử dụng kháng thể western antibodies thông thường, do đó bạn không cần thuốc thử đặc biệt để đo lường chỉ tiêu protein của bạn quan tâm.

– Thiết bị Milo và bộ vật tư tiêu hao “scWest kit” dựa trên công nghệ vi lỏng (microfluidic ) và chứa “scWest chips” nơi xét nghiệm được thực hiện và chứa tất cả các bộ đệm bạn cần phải sử dụng để chạy thử nghiệm. phần mềm “Scout” tự động phân tích dữ liệu và các kháng thể thông thường được sử dụng để thăm dò, do đó bạn có thể sử dụng các kháng thể tương tự như bạn đã làm trước đó.

Milo ™ cho phép bạn xác định nhóm quần thể tế bào mà không nhìn thấy được trong wesstern blots truyền thống, do đó bạn có thể nghiên cứu các loại tế bào khác nhau trong mẫu không đồng nhất. protein mục tiêu không thể đo với Flow cytometry? Hãy thử Milo! Nó được thiết lập sẵn, Western- Validated kháng thể và thậm chí có thể đo lường protein trong tế bào, các yếu tố phiên mã, phosphorylated proteins, hoặc các mục tiêu mà không làm được với Flow cytometry . Hiện bạn đang thực hiện nghiên cứu single-cell RNA? Milo cho bạn xác nhận trực tiếp protein của single-cell RNA, vì vậy bạn có thể tự tin hơn về kết quả biểu hiện gen của bạn là có thật.

Western- dựa trên biểu hiện protein tại hàng ngàn tế bào đơn lẻ dùng để:

Nghiên cứu biểu hiện không đồng nhất của protein
Giải pháp đo lường protein không thể phát hiện với phương pháp flow cytometry
Xác định các nhóm tế bào trong 1 mẫu

CÔNG NGHỆ VÀ ỨNG DỤNG

Hoạt động

Milo sử dụng chip scWest^TMđể có được kết quả single-cell Western trong khoảng 4 tiếng đồng hồ. Tất cả những gì bạn cần làm là cố định tế báo và chip scWest sẽ phân vùng và chụp ảnh khoảng 1000 tế bào đơn cho bạn. Sau đó Milo sẽ thực hiện SDS-PAGE trong một phút trên mỗi lysate tế bào đơn. Sau đó, chỉ cần sử dụng một kháng thể Western truyền thống có sẵn để dò chip cho mỗi 4 tế bào mục tiêu cùng lúc.

Hình 1 – scWest chip và các đơn vị Single-Cell Westerns

Nhận dạng quần thể và các dạng đồng hình của protein

Milo đo biểu hiện của protein trong khoảng 1000 tế bào đơn riêng lẻ. Điều đó có nghĩa là bạn có thể xác định các tế bào trong mẫu của bạn với từng mục tiêu là protein. Với thông tin đó, bạn có thể xác định phân nhóm của các tế bào mà không thể xác định được bằng các phương pháp truyền thống. Thêm vào đó, Milo cũng có khả năng phân biệt được các dạng đồng hình của protein, điều mà các thiết bị flow cytometry không thể thực hiện được.

Hình 2 – Một kháng thể liên kết với hai biến thể protein (Exon 1 và Exon 2) trong tế bào HEK293. Milo cho thấy ba nhóm quần thể các tế bào: tế bào chỉ thể hiện một biến thể lớn trọng lượng phân tử (Exon 1), chỉ có sự biến đổi nhỏ trong trọng lượng phân tử (Exon 2) hoặc cả 2. Ngược lại, Western Blot thông thường chỉ có thể phát hiện biểu hiện trung bình trong hỗn hợp.