Cột HPLC là thành phần chính trong hệ thống sắc ký lỏng vì nó chịu trách nhiệm phân tách các chất phân tích trong mẫu. Việc bảo vệ và chăm sóc cột không chỉ giúp chúng ta thu được kết quả phân tích đáng tin cậy mà còn đảm bảo quy trình vận hành không gặp bất kỳ sự cố nào. Vậy chúng ta cùng tìm hiểu nguyên nhân dẫn đến cột bị tắc nghẽn và cách để bảo vệ cột.

Những nguyên nhân có thể làm cho cột bị tắc nghẽn:

Nền mẫu:

Các nền mẫu được phân tích trên cột HPLC thường đa dạng và phức tạp. Các mẫu này có thể có nhiều thành phần không tương thích với các điều kiện của phương pháp HPLC. Việc tiêm những mẫu như vậy mà không có bước chuẩn bị/xử lý mẫu thích hợp có thể dẫn đến tắc nghẽn cột.

Dư lượng protein và các hợp chất kỵ nước như lipid có thể không được rửa giải hoàn toàn trong quá trình phân tách pha đảo. Những hợp chất này sẽ từ từ hấp phụ lên pha tĩnh cột và gây ra nhiều vấn đề khác nhau.

Dung dịch pha loãng mẫu và pha động không tương thích:

Nếu dung dịch pha loãng mẫu không tương thích với pha động thì khi đưa mẫu vào pha động có thể khiến mẫu bị kết tủa. Điều này thường xảy ra khi dung dịch pha loãng mẫu quá phân cực hoặc quá không phân cực so với pha động.

Dung dịch pha động:

Dung dịch đệm thường được sử dụng làm pha động trong HPLC. Điều quan trong là các dung dịch đệm này cần phải được lọc trước khi sử dụng. Đôi khi, do sự khác biệt về nhiệt độ trong phòng thí nghiệm, một số thành phần trong dung dịch đệm có thể bị kết tủa. Sử dụng dung dịch đệm có nồng độ cao cũng sẽ dễ dẫn đến hiện tượng kết tủa.

Để bảo vệ các cột HPLC (phân tích và điều chế) khỏi bị nhiễm bẩn bởi các hạt rắn trong quá trình tiêm, nền mẫu hay dung dịch đệm có muối nên sử dụng cột bảo vệ.

Cột bảo vệ (VanGuard Column) là một loại cột nhỏ, được làm từ vật liệu tương tự với cột phân tích và được gắn ở đầu cột phân tích. Các cột này có nhiều kích thước khác nhau, phù hợp với từng loại cột phân tích. Màng lọc trong cột bảo vệ giống với màng lọc của cột phân tích. Điều này có nghĩa là bất kỳ vật gì có thể làm tắc nghẽn cột phân tích sẽ bị chặn trên cột bảo vệ. Phần bị tắc nghẽn này có thể được loại bỏ bằng cách thay thế các cartridge bảo vệ, từ đó bảo vệ được tuổi thọ cột phân tích.

Khi nào thì chúng ta cần thay VanGuard Column?

Nên thường xuyên kiểm tra bề mặt cartridge, theo dõi sự tích tụ của các chất gây nhiễm bẩn và thay thế cartridge trước khi quá muộn! Nếu chất gây nhiễm không màu, vẫn nên thay cartridge thường xuyên nếu cần duy trì hiệu năng sắc ký (ví dụ như khi độ phân giải giảm 10% và/hoặc khi hiệu năng giảm 20%) hoặc nếu áp suất hệ thống tăng quá 20%.

Các yếu tố nào chúng ta nên quan tâm khi mua cột bảo vệ?

Pha tĩnh của cột bảo vệ phải giống với pha tĩnh cột phân tích để không làm thay đổi độ chọn lọc.

Đường kính trong của cột bảo vệ bằng hoặc nhỏ hơn đường kính trong cột phân tích để tránh bị doãng peak. Luôn sử dụng cột bảo vệ có đường kính trong gần nhất với đường kính trong của cột sắc ký.

Cột bảo vệ càng ngắn càng tốt vì có thể tích chết nhỏ.

Có thể thay thế cartridge với thao tác càng đơn giản càng tốt.

Waters cung cấp toàn bộ cột bảo vệ cho hầu hết các cột phân tích hiện nay. Hy vọng bài viết này sẽ giúp Quý Anh/Chị có thể nâng cao tuổi thọ của cột sắc ký mình đang dùng. Đừng chần chờ, hãy liên hệ với team Navi để nhận được sự hỗ trợ tốt nhất về những thắc mắc của Anh/Chị

Tel: 024.7309.2022 – 028.7308.2022
Website: www.navist.vn