Xây dựng chương trình gradient trong sắc ký nhằm tách các polymer (Gradient Polymer Elution Chromatography – GPEC) với phần mềm Empower

Xây dựng chương trình gradient trong sắc ký nhằm tách các polymer (Gradient Polymer Elution Chromatography – GPEC) với phần mềm Empower

GPEC là một trong những kỹ thuật LC. Trong ví dụ này, sắc ký đồ trong hình 1, ba polymer khác nhau bị đồng rửa giải khi sử dụng kỹ thuật GPC vì chúng có thể tích thủy động lực học tương tự nhau. Nếu sử dụng quá trình tách dựa trên pha đảo để tách các polymer này, các polymer sẽ tan một phần vào pha động và không tách được ra khỏi đường nền. Phương pháp GPEC sẽ kết tủa các polymer trên cột cho tới khi tỷ lệ gradient đạt điểm hòa tan các kết tủa polymer, từ đó các polymer sẽ giải phóng khỏi cột. Thay vì tách các chất dựa trên kích thước khi sử dụng GPC, các polymer sẽ được tách trên độ hòa tan khi sử dụng GPEC.

Các ứng dụng thực tiễn:

  • Kỹ thuật sản xuất, nghiên cứu từ sản phẩm.
  • Đảm bảo sự phù hợp sản phẩm theo quy mô lớn.
  • Tối ưu hóa quy trình.
  • Điều chỉnh các thông số nhiệt độ phù hợp.

Mục tiêu là tính toán phần trăm dung môi sử dụng trong pha động để tách các polymer.

Bước 1: Xây dựng bảng gradient trong công cụ Instrument Method. Ở đây, chúng ta bắt đầu với 100% MeOH và kết thúc ở 100% THF

Bước 2: Trong thẻ Data, ấn chọn các dung môi sử dụng trong gradient.

Bước 3: Các polymer đã được tách, thời gian lưu được ghi lại.

Bước 4: Peak Custom Fields được tạo để báo cáo giá trị “y” tại thời gian lưu.

Bước 5, 6: %A và %C được xử lý và ta thấy được tại tỷ lệ nào, polymer nào được rửa giải trước.

Để lại bình luận